Lost destaca-se pelo imenso contingente de personagens principais, que tem suas histórias reveladas por flashbacks. O protagonista de facto é o Dr. Jack Shephard, interpretado por Matthew Fox. Outros grandes personagens da primeira temporada incluem a fugitiva Kate Austen (Evangeline Lilly), o trambiqueiro James "Sawyer" Ford (Josh Holloway), o misterioso John Locke (Terry O'Quinn), o roqueiro Charlie Pace (Dominic Monaghan), o soldado iraquiano Sayid Jarrah (Naveen Andrews), a grávida Claire Littleton (Emilie de Ravin), o obeso Hugo "Hurley" Reyes (Jorge Garcia), Michael Dawson (Harold Perrineau Jr.) e seu filho Walt Lloyd (Malcolm David Kelley), os irmãos Boone Carlyle (Ian Somerhalder) e Shannon Rutherford (Maggie Grace) e o casal de coreanos Jin-Soo Kwon (Daniel Dae Kim) e Sun-Hwa Kwon (Yunjin Kim).